DESARROLLO DE UN NUEVO MÉTODO ANALÍTICO PARA CUANTIFICAR HEMO EN LA FORMULACIÓN ANT-00

Resumen

ANT-00 es una formulación de origen natural que contiene sangre bovina, en una matriz de otras sustancias naturales. El mismo tiene como compuesto bioactivo de mayor importancia farmacológica la molécula de hemo, que aporta la hemoglobina de la sangre bovina. El objetivo de este trabajo fue desarrollar y validar el método de cuantificación de hemo en ANT-00. El método consistió en la solubilización del hemo en una disolución de NaOH 0,1 mol/L y Tritón X-100 al 2,5 %. La concentración de hemo se determinó espectrofotométricamente a partir de la absorbancia (575 nm) de la muestra y un patrón de trabajo de hematina porcina. Se determinó la influencia en el disolvente de dos concentraciones de NaOH (0,1 y 0,5 mol/L) así como la influencia de la centrifugación. Se calculó el coeficiente de extinción molar de la hematina porcina en las condiciones de trabajo y se realizó un estudio de la estabilidad del patrón de trabajo a la concentración de 60 μg/mL durante 28 días, a temperatura de 2 a 8 °C y de 15 a 25 °C. Se evaluaron los parámetros de especificidad, linealidad, exactitud y precisión. Se obtuvo como resultado que no existen diferencias significativas entre una u otra concentración de NaOH ni entre las muestras centrifugadas o no (p > 0,05). El coeficiente de extinción molar de la hematina porcina obtenido fue de 6,465 ± 0,303 103 L/cm.mol. En el estudio de estabilidad se obtuvo que el patrón es estable a temperatura de 2 a 8 °C pero no a temperatura de 15 a 25 °C. El método además mostró ser específico, lineal, exacto y preciso, al cumplir con los criterios de aceptación requeridos.