Aislamiento y diagnóstico de cepas clínicas de enterovirus humanos por métodos convencionales y moleculares
Palabras clave:
cultivo celular, reacción en cadena de la polimerasa, células Vero, meningitis aséptica, meningoencefalitis vira, efecto citopático, líquido cefalo- rraquídeo, exudadoResumen
Los enterovirus humanos son la causa más común de meningitis y meningoencefali-
tis virales, enfermedades del Sistema Nervioso Central. Además, provocan enferme-
dades agudas y crónicas como la poliomielitis, el Síndrome de Mano, Pie y Boca, la
cardiomiopatía dilatada, la conjuntivitis hemorrágica y la diabetes mellitus. La vía de
transmisión es oral-fecal o respiratoria. Los causantes de conjuntivitis hemorrágica y
exantema son transmitidos por contacto directo o indirecto con secreciones ocula-
res y con fluidos de las vesículas. El diagnóstico confirmatorio en el laboratorio es
importante para el manejo de las infecciones provocadas por estos virus. El objetivo
del presente trabajo fue diagnosticar enterovirus humanos por métodos convencio-
nales y moleculares, a partir de muestras provenientes de pacientes con cuadro
clínico característico. Se procesaron tres tipos de muestras clínicas: líquido cefalo-
rraquídeo, heces e hisopado rectal, procedentes de dos pacientes pediátricos con
cuadro clínico de síndrome gastroentérico y estado convulsivo y encefalitis, respec-
tivamente. Las muestras se procesaron e inocularon en cultivo de células Vero para
el aislamiento viral. El diagnóstico molecular se realizó mediante una RT-PCR semi
anidada punto final, previa extracción automatizada del ácido nucleico viral. El aisla-
miento en el cultivo celular evidenció efecto citopático, indicativo de replicación
viral, en las muestras de hisopado rectal y heces, con un 75 y 100% de destrucción
de la monocapa celular, respectivamente, a las 72 horas de inoculación. Los cultivos
celulares inoculados con líquido cefalorraquídeo no mostraron efecto citopático. El
diagnóstico molecular por RT-PCR corroboró la presencia de enterovirus en las
muestras de heces e hisopado rectal, así como en el líquido cefalorraquídeo del
paciente con estatus convulsivo, coherente con el cuadro clínico mostrado. El em-
pleo simultáneo de técnicas convencionales como el aislamiento en cultivo de célu-
las y técnicas moleculares como el PCR, fortalecen, complementan y confirman el
diagnóstico clínico de las infecciones de etiología enteroviral