Identificación de actividad inhibidora de Aminopeptidasa N aislada de riñón porcino, en invertebrados marinos de la plataforma insular de La Habana

Resumen

La enzima aminopeptidasa neutra de la familia M1 (APN, EC 3.4.11.2) se en-
cuentra ampliamente distribuida en los seres vivos. En mamíferos, esta en-
zima se encuentra involucrada tanto en procesos fisiológicos como la diges-
tión, la analgesia, la activación/inactivación de péptidos regulatorios y el
control de la presión arterial así como en desórdenes de diferentes tipos
donde resaltan el cáncer, la hipertensión y desregulación del sistema inmu-
ne. Esta enzima es actualmente blanco para la búsqueda de inhibidores es-
pecíficos con potenciales aplicaciones biomédicas en dichas patologías. En el
presente trabajo primeramente se purifica parcialmente la APN a partir de
corteza de riñón porcino mediante la combinación de extracción con Triton
X-100, cromatografía de intercambio anionico en DEAE-Sephacel y cromato-
grafía de exclusión molecular en Sephadex-G200. Posteriormente, se realizó
el cribado de actividad inhibidora de la enzima purificada, en extractos acuo-
sos de invertebrados marinos. Se identificó por primera vez actividad inhibi-
dora de esta enzima, en las especies Briozoo sp2, Eucidaris tribuloides, Op-
hiocoma echinata, y Lisoclinum verrilli, así como se confirmó la inhibición de
esta enzima por Diplosoma listerianum. En todos los casos, con excepción de
la especie Lisoclinum verrilli, la inhibición fue lenta. Para todas las especies
seleccionadas la inhibición fue altamente dependiente de la dosis empleada
con valores de IC50 en el intervalo de 0.11-2.39 mg/L. El empleo de diferen-
tes tratamientos de clarificación permitió en todos los casos el incremento
de la actividad inhibidora específica. Los resultados indican que estos inver-
tebrados marinos constituyen especies promisorias para el aislamiento de
nuevos inhibidores naturales de APN